2.2.3 .TIPOS DE ESTERILIZACION
Agentes físicos
El calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor húmedo el cual destruye a losmicroorganismos por desnaturalización de las proteínas y el calor seco que destruye a losmicroorganismos por oxidación de sus componentes celulares. El calor es considerado como el métodode esterilización por excelencia siempre y cuando el material a esterilizar soporte altas temperaturas sinsufrir ningún tipo de daño.
La radiación, o emisión y propagación de la energía a travésde un medio, puede ser utilizada como agente para laeliminación de microorganismos. Así tenemos que lasradiaciones ionizantes se pueden utilizar para la esterilizaciónde materiales termolábiles, como por ejemplo materialesplásticos, y las radiaciones no ionizantes, como la luzultravioleta, puede ser empleada en el control de áreascerradas.
a) Esterilización por calor
:El calor es el método de elección para esterilizar el material delaboratorio resistente a las altas temperaturas. La temperaturay el tiempo requeridos para esterilizar un material dependende que se esté utilizando calor seco o calor húmedo.Esterilización con calor seco: La acción bactericida del calor seco se debe a la oxidación física de un procedimiento lento ocoagulación de la proteína bacteriana por quemadura. Enausencia de humedad se necesita una temperatura más alta,ya que en esta forma los microbios son destruidos al absorber el calor. Pueden ser dos tipos:
Directa: flameado o incineración más utilizada enlaboratorios y en algunos hospitales pequeños.
Indirecto: aire caliente u horno de Pasteur contemperatura de 160ºC a 180ºC por 1 a 2 horas siendoel más eficaz y seguro el eléctrico.Ventajas:
El aire caliente penetra ciertos materiales que no sepueden esterilizar en el autoclave
Puede utilizarse en laboratorios para la esterilización deartículos de vidrio
El calor seco da protección en esterilización deinstrumentos delicados con punta o filo al que dañaríael vapor
El acero no se corroe o decoloraDesventajas:
Se requiere más tiempo de acción, porque el airepenetra con lentitud y uniformidad
El tiempo y la temperatura varían según el tipo dematerial
La sobre exposición puede dañar algún producto
Destruye telas o material de cauchoEsterilización con calor húmedo:
El calor húmedo es la forma de vapor saturado a presión es eficaz parala destrucción de todas las formas microbianas, incluso espora. La muerte de las bacterias es causadapor la desnaturalización y coagulación de su proteína o su sistema
intercelular enzima-proteína. Estasreacciones son catolizadas por medio del agua. Estas pueden de dos tipos:
Calor húmedo discontinuo: algunos medios de cultivo que contiene carbohidratos como lagelatina, leche, etc. no soportan temperaturas elevadas y se realiza mediante los siguienteprocedimientos:
Tindalización: hace uso del calor húmedo, para una buena esterilización se deberealizar a 100ºC por ½ hora (por tres veces discontinuas) durante 1 día.
Ebullición: es el paso de un líquido al estado de vapor. El agua en ebullición representaen forma eficaz y práctica de proporcionar una desinfección de alto nivel deinstrumentos y guantes que entren en contacto de las membranas mucosas, si bien alhervirlos por 20 minutos se aniquilan todas las formas vegetativas de las bacterias, losvirus, las levaduras y los hongos, pero no destruye a las esporas.
Pasteurización:
elimina a todos los microorganismos no esporulados se puede variar lastemperaturas por ejemplo: 62ºC por 30 min.; 70ºC por 15 min. Se utiliza para preservar alimentos como ser leche, cerveza.
Vapor a presión: conocido como autoclave, que posee todos los requisitos indispensables comogrados de temperatura y tiempo de exposición, que junto con el tamaño del autoclave y el flujo delvapor, la densidad y el tamaño de la carga en la cámara aumentan la tasa se muerte de losmicroorganismos, en una temperatura de 121ºC – 132ºC durante 15 minutos o más.Ventajas:
Es más fácil segura y eficaz
El uso del vapor es el procedimiento más rápido, el ciclo total de tiempo es más corto
Es más barato y de obtención más fácil
La mayoría de las autoclaves poseen controles automáticos y dispositivos de controlDesventajas:
Se requiere mucho cuidado en la preparación y confección de bultos, en la carga y manejo delautoclave, así como el secado de los artículos
Los artículos a esterilizar deben estar limpios, sin grasa ni aceite
El vapor tiene que estar en contactó directo con todas las partes de los artículos
Los ciclos de tiempo se ajustan según el tipo de material y tamaño de la carga
El vapor puede no ser puroLa cámara presurizada utilizada normalmente en el laboratorio es el autoclave.
En muchos aspectos unaautoclave se parece a una olla de presión casera. De hecho, en algunos pequeños laboratorios demicrobiología se utilizan estas ollas en lugar de autoclaves. Ambos son recipientes de metal con paredessuficientemente fuertes para resistir la presión de vapor.Las autoclaves son grandes cámaras de acero inoxidable que funcionan automáticamente. Los objetosdeben ser colocados de manera que el vapor de agua entre en contacto con todas las partes de cada unode ellos, y el aire no quede atrapado en su interior. El aire que no es reemplazado por vapor crea unabolsa seca, donde la esterilización no será efectiva.
b) Esterilización por radiación:
La ionización por radiación genera iones al liberar electrones de losátomos, estos se desprenden violentamente con átomos adyacentes y se une a ellos, o bien sedesprenden del segundo átomo. La energía liberada se transforma en energía térmica o química la cualcausa la muerte de los microorganismos al romper la molécula del ADN e impide la división molecular y lapropagación de la vida. Las principales fuentes de radiación ionizante son las partículas Beta y rayosgamma.Ventajas:
Penetra la morí parte de todos los materiales para esterilizarlos con confiabilidad
Es el método de esterilización más eficaz
No genera radiación residual
Penetran en objetos grandes y voluminosos
2) Agentes mecánicos
La filtración permite la remoción de todos los microorganismos presentes en un líquido o un gasreteniéndolos sobre la superficie de un material.
Filtración:
Las células microbianas pueden retirarse de los líquidos o gases por filtración. La filtración eslenta y cara (debe usarse un filtro nuevo cada vez); por esta razón, se utiliza sólo para los líquidostermolábiles, que no se pueden esterilizar en el autoclave. Los sólidos termolábiles también se puedenesterilizar por filtración, si previamente se disuelven en un líquido. Técnicamente, la filtración no esterilizaporque los virus pueden pasar a través de los filtros, pero el proceso es suficiente para la mayoría de losestudios de rutina que se llevan a cabo en el laboratorio.Los filtros utilizados se denominan
filtros de membrana.
Estas membranas están compuestas denitrocelulosa, con un poro de diámetro constante. La nitrocelulosa es un derivado químico de la celulosa,que también se utiliza como explosivo. El diámetro de poro es aproximadamente 0,45 µm; este tamaño eslo suficientemente pequeño como para eliminar todos los microorganismos, con excepción de los virus yalgunas bacterias muy pequeñas. Un líquido se filtra haciéndolo pasar a través de un filtro de membranaacoplado a un matraz especial. Para hacer pasar el líquido por el filtro se utiliza una bomba de vacío; losmicroorganismos quedan en la superficie de la membrana. La filtración es el método de elección paraesterilizar soluciones de vitaminas, antibióticos v otros compuestos termolábiles, que son añadidos a losmedios.
3) Agentes químicos
Algunas sustancias químicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes porque tienen la capacidadde promover una o más reacciones químicas capaces de dañar los componentes celulares de losmicroorganismos (proteínas, membranas, etc.)
Esterilización por gas oxido de etileno:
Este es un gas incoloro, soluble en agua y en solventescomunes, se emplea para esterilizar objetos sensibles al calor, este proceso es relativamente lento. Elpoder bactericida depende de la concentración del mismo gas, temperatura, humedad y tiempo deexposición. La actividad esporicida se produce por aniquilación de los grupos terminales hidroxilo,carboxilo, amino y sulfridrilo.Ventajas:
Es un buen sustituto eficaz cuando los artículos no pueden ser esterilizados por calor
Es anticorrosivo y no daña el material
Penetra totalmente todo el material poroso
No deja película sobre los instrumentosDesventajas:
Es un proceso complicado por lo que se debe usarse indicadores biológicos
La esterilización lleva más tiempo, es un proceso lento y largo
Necesita equipo especial y costoso
Puede formar productos secundarios tóxicos
Necesita ser ventilado por lo menos 24 horas
Por frecuentes esterilizaciones pueden formar y aumentar residuos totales de gas en artículosporosos
En contacto con la piel produce vesículas y aún quemaduras
Si se inhala puede ser irritante para las mucosas
Esterilización por glutaraldehido:
La solución acuosa de glutaraldehido activado y amortiguado al 2%,destruye a los microorganismos por desnaturalización de la proteína. Es preferida para esterilizar instrumentos que no pueden esterilizarse al vapor o no se cuenta con otro método de esterilización.
No es absorbible por caucho ni plástico
Es poco volátil de modo que puede reutilizarse
Es eficaz a la temperatura ambiente
Es anticorrosivo, no mancha y eficaz para esterilizar instrumentos
Tiene una tensión superficial baja
Desventajas:
Puede ser irritante, por lo tanto se debe enjuagar exhaustivamente con agua estéril
Es una solución con olor Es costoso
Control del proceso de esterilización:
Todos los procesos de esterilización se deben controlar para poder asegurar que han sido efectivos. Paraello se pueden utilizar indicadores físicos, químicos y/o biológicos, los cuales deben ser colocados encada carga de esterilización.
Estos métodos provocan la perdida de viabilidad de los microorganismos.
En comparación con los procedimientos físicos, éstos métodos tienen una importancia secundaria. Los antisépticos son considerados venenos protoplasmáticos que, al actuar sobre los gérmenes, los destruyen. Algunos de ellos ejercen su acción nociva sobre todas las células, por lo cual se les considera venenos generales, por el contrario otros actúan sobre algunas especies bacterianas, mostrándose como venenos específicos. Este método es óptimo para la antisepsia de las manos del operador, de locales, de mesas de trabajo, de jaulas de animales, y para destruir gérmenes que puedan caer en lugares de trabajo.
AGENTES QUÍMICOS
La Iodopovidona (pervinox), el Cloruro de Benzalconio (sal de amonio cuaternario o Cloruro de Zefirano) son ejemplos de antisépticos útiles para desinfectar manos y superficies. Cuando la superficie es resistente, el mejor agente biocida es el Hipoclorito de Sodio (agua lavandina).
ESTUFAS DE ESTERILIZACION POR OXIDO DE ETILENO
Destruye todos los organismos y microorganismos conocidos, incluso esporas y virus. Esteriliza sin deterioro artículos de goma, plástico, metal, madera, lana, piel, papel, productos farmacéuticos.
Esterilización con embalajes: a este gas son permeables sustancias como polietileno, nylon, celofán, etc.
En 1928, autores americanos: Bac, Cotton y Ellington; Schrader y Bossert y Autores alemanes: Gassner y Hase, descubrieron las propiedades del óxido de etileno.
En 1933 fueron certificadas las propiedades del óxido de etileno en un laboratorio de La Sorbona y en 1939 se estudió en un laboratorio de investigación del Ejercito de U.S.A.
El óxido de etileno era bactericida, esporicida, con gran poder de penetración, efectivo a bajas temperaturas y penetra sustancias porosas; para evitar su poder explosivo y su alto potencial inflamable se mezcló con CO2 en una proporción de 7,15 veces el volumen de óxido de etileno.
Trabajo de Phillips y Kaye.
El tiempo de esterilización que requiere el material depende de múltiples variables, el vacío que se produce, la humedad, la concentración del gas expresado en gs./l y la temperatura, es decir que reduciendo la temperatura aumenta el tiempo de exposición requerido.
El gas se adquiere en botellas metálicas o cartuchos que se vaporizan, cambian de líquido a gas a 10º C.
Todos los artículos deberán airearse por 6 hs. después de una esterilización.
El Oxido de etileno es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrógenos lábiles como los que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos, hidroxilos, etc.
Es utilizado en la esterilización gaseosa, generalmente en la industria farmacéutica. Destruye todos los microorganismos incluso virus. Sirve para esterilizar material termosensibles como el descartable (goma, plastico, papel, etc.), equipos electrónicos, bombas cardiorrespiratorias, metal, etc. Es muy peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, y además cancerigeno.
Destruye todos los organismos y microorganismos conocidos, incluso esporas y virus. Esteriliza sin deterioro artículos de goma, plástico, metal, madera, lana, piel, papel, productos farmacéuticos.
Esterilización con embalajes: a este gas son permeables sustancias como polietileno, nylon, celofán, etc.
En 1928, autores americanos: Bac, Cotton y Ellington; Schrader y Bossert y Autores alemanes: Gassner y Hase, descubrieron las propiedades del óxido de etileno.
En 1933 fueron certificadas las propiedades del óxido de etileno en un laboratorio de La Sorbona y en 1939 se estudió en un laboratorio de investigación del Ejercito de U.S.A.
El óxido de etileno era bactericida, esporicida, con gran poder de penetración, efectivo a bajas temperaturas y penetra sustancias porosas; para evitar su poder explosivo y su alto potencial inflamable se mezcló con CO2 en una proporción de 7,15 veces el volumen de óxido de etileno.
Trabajo de Phillips y Kaye.
El tiempo de esterilización que requiere el material depende de múltiples variables, el vacío que se produce, la humedad, la concentración del gas expresado en gs./l y la temperatura, es decir que reduciendo la temperatura aumenta el tiempo de exposición requerido.
El gas se adquiere en botellas metálicas o cartuchos que se vaporizan, cambian de líquido a gas a 10º C.
Todos los artículos deberán airearse por 6 hs. después de una esterilización.
El Oxido de etileno es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrógenos lábiles como los que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos, hidroxilos, etc.
Es utilizado en la esterilización gaseosa, generalmente en la industria farmacéutica. Destruye todos los microorganismos incluso virus. Sirve para esterilizar material termosensibles como el descartable (goma, plastico, papel, etc.), equipos electrónicos, bombas cardiorrespiratorias, metal, etc. Es muy peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, y además cancerigeno.
Con aldehídos
Son agentes alquilantes que actúan sobre las proteínas, provocando una modificación irreversible en enzimas e inhiben la actividad enzimática. Estos compuestos destruyen las esporas.
Son agentes alquilantes que actúan sobre las proteínas, provocando una modificación irreversible en enzimas e inhiben la actividad enzimática. Estos compuestos destruyen las esporas.
Glutaraldehído:
Consiste en preparar una solución alcalina al 2% y sumergir el material a esterilizar de 20 a 30 minutos, y luego un enjuague de 10 minutos.
Este método tiene la ventaja de ser rápido y ser el único esterilizante efectivo frío. Puede esterilizar plástico, goma, vidrio, metal, etc.
Consiste en preparar una solución alcalina al 2% y sumergir el material a esterilizar de 20 a 30 minutos, y luego un enjuague de 10 minutos.
Este método tiene la ventaja de ser rápido y ser el único esterilizante efectivo frío. Puede esterilizar plástico, goma, vidrio, metal, etc.
Antisépticos
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Alcoholes
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Iodo
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Agentes catiónicos, aniónicos y anfóteros
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Organo Mercuriales
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Colorantes
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Desinfectantes y/o Esterilizantes
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Cloro y Compuestos clorados
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Aldehídos
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Oxido de Etileno
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Compuestos Fenólicos
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Acidos y Alcalis
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Formaldehído:
Se utilizan las pastillas de paraformaldehido, las cuales pueden disponerse en el fondo de una caja envueltas en gasa o algodón, que después pueden ser expuesta al calor para un rápida esterilización (acción del gas formaldehído). También pueden ser usadas en Estufas de Formol, llamadas también de formalina, que son cajas de doble fondo, en cuya base se colocan las pastillas y se calienta hasta los 60° C y pueden esterilizar materiales de látex, goma, plásticos, etc.
Las pastillas de formalina a temperatura ambiente esterilizan en 36 hs.
Se utilizan las pastillas de paraformaldehido, las cuales pueden disponerse en el fondo de una caja envueltas en gasa o algodón, que después pueden ser expuesta al calor para un rápida esterilización (acción del gas formaldehído). También pueden ser usadas en Estufas de Formol, llamadas también de formalina, que son cajas de doble fondo, en cuya base se colocan las pastillas y se calienta hasta los 60° C y pueden esterilizar materiales de látex, goma, plásticos, etc.
Las pastillas de formalina a temperatura ambiente esterilizan en 36 hs.
· El tipo de radiación
· El tiempo de exposición
· La dosis
Radiaciones Ionizantes:
Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los ácidos nucleicos, estructuras proteicas y lipídicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los microorganismos.
Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolábiles (termosensibles) como jeringas
Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los ácidos nucleicos, estructuras proteicas y lipídicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los microorganismos.
Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolábiles (termosensibles) como jeringas
Rayos Ultravioleta:
Afectan a las moléculas de DNA de los microorganismos. Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies, se utilizan para la esterilización en quirófanos.
Afectan a las moléculas de DNA de los microorganismos. Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies, se utilizan para la esterilización en quirófanos.
Rayos Gamma:
Su empleo esta basado en los conocimientos sobre la energia atomica. Este tipo de esterilización se aplica a productos o materiales termolábiles y de gran importancia en el campo industrial. Puede esterilizar antibióticos, vacunas, alimentos, etc.
Su empleo esta basado en los conocimientos sobre la energia atomica. Este tipo de esterilización se aplica a productos o materiales termolábiles y de gran importancia en el campo industrial. Puede esterilizar antibióticos, vacunas, alimentos, etc.
Control de calidad: La correcta esterilización se puede controlar mediante dos métodos, siendo el segundo el más seguro.
Indicadores: Cintas comerciales que se colocan en el paquete o caja a esterilizar, que viran de color, cuando se alcanzan las temperaturas adecuadas para la esterilización.
Indicadores: Cintas comerciales que se colocan en el paquete o caja a esterilizar, que viran de color, cuando se alcanzan las temperaturas adecuadas para la esterilización.
http://www.monografias.com/trabajos24/esterilizacion-laboratorio/esterilizacion-laboratorio.shtml
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